Determinación do contido de ácido oxálico en froitas e verduras por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC)
1. Principio experimental e deseño do método
Como ácido orgánico común nas froitas e verduras, o contido de ácido oxálico afecta directamente o sabor e o valor nutricional dos alimentos. Este experimento emprega cromatografía líquida de alta resolución en fase inversa (RP-HPLC). En condicións ácidas da fase móbil, o ácido oxálico sepárase na liña base das substancias interferentes mediante unha columna cromatográfica C18. Para a análise cuantitativa utilízase un detector ultravioleta axustado a 210 nm, baseado nas características de absorción UV dos grupos carboxilo nas moléculas de ácido oxálico.
2. Curva estándar e preparación da mostra
Emprégase un método de dilución en gradiente para preparar solucións estándar: pesar con precisión 25,0 mg de ácido oxálico dihidratado e diluír a 25 mL con auga ultrapura para obter unha solución madre de 1 mg/mL. Esta dilúese secuencialmente nunha serie de solucións estándar a 50, 100, 200, 400 e 800 µg/mL, con cada concentración inxectada por triplicado.
Para a preparación da mostra, utilízase a extracción asistida por microondas: pesar 5,00 g de homoxenado de froitas/verduras, engadir 10 mL de solución de ácido clorhídrico a 0,1 mol/L, tratar a 60 °C con microondas durante 10 minutos, filtrar a través dun filtro de membrana de 0,45 µm e recoller o filtrado para a súa análise.
3. Optimización das condicións cromatográficas
A fase móbil é un sistema tampón de fosfato dihidróxeno de potasio a 0,01 mol/L (pH 2,5)-acetonitrilo (95:5), cun caudal de 0,8 mL/min e unha temperatura da columna de 35 °C. O axuste da proporción de acetonitrilo mostra que cando a fase orgánica supera o 10 %, o tempo de retención do ácido oxálico acúrtase a menos de 3 minutos, pero prodúcese unha formación de cola no pico. Nas condicións finais optimizadas, o tempo de retención do ácido oxálico é de 4,2 minutos, conseguindo unha separación completa do ácido cítrico e do ácido málico adxacentes (resolución > 1,5).
4. Validación do método
A verificación do rango lineal mostra unha boa relación lineal entre a área do pico e a concentración no rango de 10–1000 µg/mL (R² = 0,9993). O límite de detección (LOD), determinado polo método da relación sinal-ruído, é de 0,5 µg/mL. Nas probas de repetibilidade, a RSD para seis determinacións repetidas da mesma mostra de espinafre é do 1,8 %. Os experimentos de recuperación de picos a tres niveis (80 %, 100 % e 120 %) producen recuperacións medias do 98,2 %, 102,4 % e 97,8 %, respectivamente, o que cumpre os requisitos para a análise cuantitativa.
5. Análise de mostras reais
Analizáronse seis froitas e verduras dispoñibles comercialmente: espinacas (356 ± 12 mg/100 g), apio (215 ± 9 mg/100 g), tomate (18 ± 2 mg/100 g), mazá (6 ± 1 mg/100 g), plátano (non detectado) e brócoli (89 ± 5 mg/100 g). Unha comparación co método estándar nacional (GB 5009.277-2016) mostra que a desviación relativa entre os dous métodos é inferior ao 5 %, o que verifica a fiabilidade deste método. En particular, o método HPLC presenta unha maior sensibilidade que os métodos de titulación tradicionais ao analizar mostras de baixo contido.
6. Notas clave
Controle estritamente o valor do pH durante o pretratamento da mostra. Se o pH do extracto supera 3, a precipitación de oxalato de calcio levará a resultados baixos da proba. A fase móbil debe prepararse fresca diariamente para evitar a precipitación de sal e o bloqueo da columna. Despois de cada 20 inxeccións, lave a columna con acetonitrilo-auga (30:70) durante 30 minutos para evitar a degradación da eficiencia da columna. Para mostras que conteñen pigmentos (por exemplo, col morada), recoméndase engadir un paso de purificación por extracción en fase sólida antes da inxección.
7. Instrucións de aplicación e expansión
Este método pódese estender á detección de ácido oxálico en mostras biolóxicas como a urina e o sangue. Axustando a composición da fase móbil (por exemplo, engadindo hidróxido de tetrabutilamonio), pódese determinar simultaneamente o ácido oxálico e os seus metabolitos. Combinado cun detector de espectrometría de masas, pódese establecer un método de detección de trazas máis preciso. Na industria de procesamento de alimentos, este método pode proporcionar un importante apoio de datos para a selección de variedades con baixo contido de ácido oxálico e a optimización dos procesos de cocción.
Zibo Anhao Chemical Co., Ltd. – Ácido oxálico
Zibo Anhao Chemical Co., Ltd. é un provedor e exportador fiable de ácido oxálico de alta calidade (grado industrial, 99,6 % mín.) de Shandong, China. O noso ácido oxálico é un sólido cristalino branco, tamén coñecido como ácido etanodioico, coa fórmula molecular C₂H₂O₄. Presenta alta pureza, baixas impurezas e calidade estable en todos os lotes, o que satisface as demandas das industrias téxtil, do coiro, da metalurxia, do procesamento de terras raras, da limpeza química e da construción.
Suministramos ácido oxálico anhidro e dihidratado, dispoñible en sacos de 25 kg, 50 kg e 1000 kg a granel. Con procedementos de control de calidade rigorosos, informes de probas completos e plans de subministración flexibles, garantimos unha entrega estable e un rendemento consistente para os compradores de todo o mundo. Os nosos produtos foron amplamente exportados ao sueste asiático, Europa, África e América, gañando recoñecemento pola súa calidade fiable e prezos competitivos.
Escolla Zibo Anhao Chemical para un subministro fiable de ácido oxálico e un servizo químico profesional integral.
Escolla Zibo Anhao Chemical para obter ácido oxálico de alta pureza que ofreza un rendemento estable e valor para o seu negocio. Póñase en contacto connosco para pedidos a granel ou especificacións técnicas: info@anhaochemical.com
